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為什麼細胞培養首先裂解紅細胞?

2022-12-23

基本介紹
紅細胞裂解液是去除紅細胞最簡單易行的方法之一,即用裂解液裂解紅細胞,不損傷有核細胞,能充分去除紅細胞。裂解液裂解是一種溫和的紅細胞去除方法,主要用於酶消化分散的組織細胞的分離純化,淋巴細胞的分離純化,以及組織蛋白和核酸實驗中紅細胞的去除。酸提取。紅細胞裂解液得到的組織細胞不含紅細胞,可進一步用於原代培養、細胞融合、流式細胞術、核酸和蛋白質的分離提取等。

使用說明
組織細胞樣本
1. 新鮮組織經胰/酶或膠原酶消化分散成單細胞懸液,離心棄上清。

2. 從4℃冰箱中取出ELS裂解液,將ELS裂解液按1:3-5的比例加入細胞沉澱(1ml細胞壓實液中加入3-5ml裂解液),輕輕吹勻。

3. 800-1000rpm離心5-8分鐘,棄去上層紅色澄清液體。

4. 收集沉澱部分,用Hank's液或無血清培養液離心2-3次。

5、如果破解不完全/完全可以重複步驟2和3。

6、用於後續實驗的重懸細胞;如果提取 RNA,最好在步驟 4 中使用 DEPC 水製備的溶液中提取

紅細胞的生命週期很短,只有120天,但是它們繁殖血液的速度非常快,而且在這種情況下它們的細胞分裂能力特別強,而且是所有細胞中分裂速度最快的,所以這個細胞很有價值,所以它對細胞培養非常有用。它很簡單,裡面沒有任何細胞器,只有細胞膜和蛋白質。

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